方法 1: 抽出方法 (現在我が国で採用されている方法。純度は低くなりますが、製造コストは低くなります。)
オキシトシン溶液の抽出: 乾燥した下垂体後葉粉末 100 g と石英粉末 30 g をボールミルに入れ、蒸留水を加えます。同じ手順で抽出を 4 回実行します。各ステップで追加する蒸留水の量は次のとおりです。最初の 2 つの抽出では 1.4 L、その後の 2 つの抽出では 1.3 L です。各抽出は 45 分間実行され、その後遠心分離されて液体が収集されます。残った残留物はさらに抽出されます。得られた 4 つの抽出物を合わせて、オキシトシン溶液を生成します。要約: 乾燥下垂体後葉粉末 [水、ボールミル] → オキシトシン抽出物 → クロマトグラフィー分離。
前処理した合成ゼオライト 1,500 g を取り、-0.25% 酢酸溶液 20 L を加え、-撹拌後-混合物をイオン交換カラムに注ぎます。-。酢酸溶液のレベルがゼオライト床の表面から 2 ～ 3 cm 上の点まで下がったら、すぐにオキシトシン抽出物を導入します。適切な流量を維持し、得られた白濁した溶出液を収集します (この画分には主にオキシトシンが含まれています。オキシトシンの等電点 [pI] が 7.7- であるのに対し、バソプレシンの pI は 10.9 です。バソプレシンは容易に陽イオンを形成するため、カラムに吸着されます)。抽出液の液面がゼオライト床の表面まで下がったら、すぐに蒸留水を加え、流れが止まるまで濁った溶出液の収集を続けます。氷酢酸を使用して、収集した濁った溶出液の pH を 3.5 に調整します。溶液を水浴中で 95 度まで急速に加熱し、この温度を 3 分間維持し、その後溶液を急速に冷却し、一晩冷蔵庫で保存します。要約すると、オキシトシン抽出物 [HAc、合成ゼオライトカラム] → 濁った溶出液 [HAc、加熱] → 分離溶液 → 吸着と溶出。翌日、冷却した溶液を濾過します。ろ液に、撹拌しながら 10% ベントナイト スラリーを加えます (ろ液 100 mL あたりスラリー 3 mL を加えます)。吸着を促進するために 1 時間撹拌を続けた後、混合物を遠心分離します。スルホサリチル酸試薬溶液を使用して上澄み液をテストします。沈殿物が存在しない場合は、吸着プロセスが完了したことを示します。吸着が不完全な場合は、ベントナイト処理プロセスを繰り返します。続いて、両方の吸着ステップで得られたベントナイト沈殿物を合わせます。ベントナイトは、1% 酢酸を使用して 4 回溶出されます (それぞれ、容量は 1.6 L、1.4 L、1.2 L、および 0.8 L)。溶液が 80 度に加熱されたら、溶出液ごとに *tert*-ブチルトリクロリドを加えます。次に温度を 95 度まで上げ、25 度まで急速に冷却し、濾過または遠心分離します。得られた 4 つの濾液を組み合わせて、効力とバソプレシンの限界を決定します。プロセスの流れは次のとおりです: 冷蔵溶液 [ろ過] → ろ液 [ベントナイト スラリー] → 吸着物 [1% HAc] → 溶出液。オキシトシン注射の準備:
品質基準を満たしたアッセイ済みのオキシトシン溶液は、5 U/mL または 10 U/mL の濃度に希釈されます。次に、No. 4 または No. 5 の焼結ガラス漏斗でろ過し、アンプルに充填し、100 度で 30 分間蒸気を流して滅菌して、最終製品が得られます。オキシトシン溶液（検定済）［ろ過・充填・滅菌］→オキシトシン注射の流れとなります。
合成ゼオライトの再生：合成ゼオライトを蒸留水で２回洗浄する。次いで、水１．５Ｌ（ゼオライト５００ｇとして計算）、塩化ナトリウム１５０ｇを加え、２時間撹拌してバソプレシンを洗い流す。次いで、ゼオライトを、塩化物イオンが残らなくなるまで蒸留水で洗浄する。適量の水を加え、水酸化ナトリウムを使用してpHを9に調整します。混合物を３０分間撹拌し、その後上清をデカントする。ゼオライトを蒸留水で洗浄し、硫酸を使用して pH を 5.5 ～ 6 に調整し、ほぼ中性になるまで再度水で洗浄します。次に、濾過して余分な水を除去し、将来の使用に備えて 105 度で乾燥させます。使用前に適量の水を加え、撹拌しながら氷酢酸でpHを調整して浸漬してください。 10% ベントナイト スラリーの調製: ベントナイトと水を質量-対-の体積比 1:10 で混合します。混合物を約１時間粉砕し、その間に酢酸を加えて安定なｐＨを３．５に維持する。得られたスラリーは、将来の使用に備えて冷蔵庫に保管されます。方法 2: 化学合成。まず、ベンジルオキシカルボニル-ロイシン*p*-ニトロフェニルエステルから出発してヘプタペプチドアミド（セグメント3～9）が合成されます。次に、ベンジルオキシカルボニル-S-ベンジルシステイン-チロシンアジド（セグメント1～2）が合成されます。そして3番目のステップでは、オキシトシンが合成されます。